高密度聚乙烯陰性對照材料由HATANO研究所研發(fā)生產(chǎn)，廣泛應(yīng)用于體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)，可以滿足GB/T 16886.5和 ISO 10993.5 醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)-體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn) 標(biāo)準(zhǔn)中對陰性對照材料-高密度聚乙烯的技術(shù)參數(shù)要求。

第一、對照材料的定義

對照材料是指具有充分重現(xiàn)性的一種或多種特性值，并經(jīng)過定性，能用于標(biāo)定儀器、 評(píng)價(jià)測量方法或給材料賦值的材料或物質(zhì)。對照材料一般可分為陰性對照材料和陽性對照材料。陰性對照材料指當(dāng)按規(guī)定步驟試驗(yàn)時(shí)，在試驗(yàn)系統(tǒng)中證明能出現(xiàn)再現(xiàn)性、 適當(dāng)?shù)年幮?、無反應(yīng)性或自身反應(yīng)的材料或物質(zhì)。 當(dāng)按照描述的方法進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)，通過對照材料可說明試驗(yàn)的可重復(fù)性，并達(dá)到預(yù)見的陰性反應(yīng)或陽性反應(yīng)，從而證實(shí)試驗(yàn)方法是正確和可靠的。同時(shí)使用對照材料作為陽性或陰性對照可以保證實(shí)驗(yàn)室之間結(jié)果的可比性。

第二、Hatano高密度聚乙烯特點(diǎn)：

Hatano高密度聚乙烯可以滿足國標(biāo)GB/T 16886.5和ISO標(biāo)準(zhǔn)ISO 10993.5的技術(shù)要求，具有批次重現(xiàn)性好，性能穩(wěn)定、規(guī)格大小豐富，可以滿足體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)或植入實(shí)驗(yàn)的不同要求。具體尺寸如下：

第三、實(shí)驗(yàn)方法：

1、高密度聚乙烯對照材料在37℃左右用培養(yǎng)基浸提24小時(shí)，制備出實(shí)驗(yàn)樣本陰性對照浸提液。

2、將高密度聚乙烯陰性對照材料浸提液稀釋

3、將細(xì)胞懸液加入96孔組織培養(yǎng)微量滴定板孔中，在37℃，95%空氣，5%CO2，90%濕度培養(yǎng)箱中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)24 h。

4、在相差顯微鏡下觀察每個(gè)板，記錄不同組細(xì)胞的形態(tài)學(xué)差異。

5、鏡下觀察后移除孔板中的培養(yǎng)基，將50μl MTT溶液加到每個(gè)孔板中，將平板在37℃培養(yǎng)箱中孵育2 h。

6、棄去MTT溶液，每孔加入100μl有機(jī)溶液。振蕩平板，置于配置570 nm濾光片的光度計(jì)上測定吸光度。計(jì)算細(xì)胞存活性。

最后：HATANO研究所研發(fā)的高密度聚乙烯陰性對照材料具有材料均勻、 性質(zhì)穩(wěn)定， 細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果具有可重復(fù)性， 可以作為醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)-體外細(xì)胞毒性測定的對照材料。